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Hot-Start Taq DNA Polymerase Z7211S·Z7211M·Z7211L

時間:2018-05-16 10:42:41

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品牌:Vstar | 貨號: Z7211S·Z7211M·Z7211L

·  英文名稱Hot-Start Taq DNA Polymerase

·  儲存條件 : -20℃保存

·  單位 :



產品貨號

產品品牌:

產品規格:

基本售價:

Z7211S

Vstar

200U

111.00

Z7211M

Vstar

1000U

441.00

Z7211L

Vstar

5000U

1758.00

產品介紹:

Hot-Start Taq DNA Polymerase是一種僅當溫度高于45℃時才具有DNA聚合酶活性的Taq DNA Polymerase(簡稱Taq酶)與其可逆抑制劑的混合物,俗稱熱啟動Taq酶或HS Taq酶。使用本產品進行PCR反應時可以在室溫操作,并能有效避免室溫操作時由于普通Taq酶或其它耐熱DNA聚合酶存在活性而導致的非特異性PCR背景。

Hot-Start Taq DNA Polymerase是Taq酶與其可逆性抑制劑的混合物。該抑制劑可以可逆性地結合于Taq酶活性位點,當溫度低于45℃時,形成非活性的Taq酶和抑制劑的復合物,從而抑制了Taq酶的活性。在常規PCR反應過程中,當溫度升高至45℃或以上時,Taq酶和其可逆性抑制劑解離,從而發揮其正常的DNA聚合酶活性。上述機制使Hot-Start Taq DNA Polymerase僅在加熱到45℃或以上時才會有酶活性,從而確保了小于45℃時不會發生非特異性的DNA聚合反應,有效降低了PCR的非特異性背景,提高了PCR反應的準確性和精確性。

常規的DNA分離純化操作,例如PCR純化試劑盒或DNA凝膠回收試劑盒和乙醇沉淀等操作,都能有效去除本產品中的抑制劑,以避免可能的對于后續反應的干擾。

Hot-Start Taq DNA Polymerase使用時無需額外的高溫孵育步驟以釋放Taq酶活性。

Hot-Start Taq DNA Polymerase和普通的Taq DNA Polymerase一樣,可以催化5'至3'方向的依賴于DNA模板的DNA的聚合反應,沒有3'至5'的外切酶活性,最終會導致PCR產物的3'末端產生3'-dA overhangs,即產生帶一個A的3'粘端,可直接用于TA克隆。

來源:本產品使用的Taq DNA Polymerase為recombinant Taq DNA Polymerase,通過大腸桿菌表達純化獲得,和純化獲得的天然Taq DNA Polymerase在各方面的性質相同。

用途:高背景和有非特異性條帶的PCR,高專一性PCR(high-specificity PCR),高靈敏度PCR,AG亚洲芯片分析(microarray analysis),常規PCR,克隆PCR、TA克隆等,不建議用于熒光定量PCR (qPCR)。

活性定義:One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 70℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 67mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl2, 1 mM 2-mercaptoethanol, 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]dTTP。

純度:不含DNA內切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,滿足常規PCR反應要求。

酶儲存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5% (v/v) Nonidet P40, 0.5% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。10X Hot-Start PCR Buffer:100 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 500 mM KCl, 15mM MgCl2, 0.8% (v/v) Nonidet P40。

失活或抑制:酚氯仿抽提可以使Hot-Start Taq DNA Polymerase失活,加入脫氧膽酸鈉至0.06%,SDS至0.01%,或 sarkosyl至0.02%均可以抑制Hot-Start Taq DNA Polymerase。

注意事項: 

由于PCR反應非常靈敏可以擴增目的基因序列超過1000萬倍,在使用Hot-Start Taq Polymerase時請注意避免微量待擴增DNA的污染,并盡量考慮設置不加模板的空白對照以確認是否有待擴增DNA的污染。

Hot-Start Taq DNA Polymerase在PCR過程中每循環的出錯幾率約為2.2×10-5,對于大于1kb的DNA片段的克隆推薦使用出錯幾率更低的DNA聚合酶,例如Pfu DNA Polymerase等。對于普通的PCR或RT-PCR定性檢測或定量檢測,Hot-Start Taq DNA Polymerase是最佳選擇。

本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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